ภาพรวมและการเตรียม Icatibant acetate

ภาพรวม

อะซิเตตที่ละลายน้ำได้ เป็นวิธีการรักษาเฉพาะโรคสำหรับ hemangioid angioma (HAE) ที่พัฒนาโดย Shire ซึ่งได้รับการอนุมัติจาก FDA เมื่อวันที่ 25 สิงหาคม 2554 สำหรับการจัดการตอนเฉียบพลันของ angioedema ทางพันธุกรรมในผู้ใหญ่อายุ 18 ปีขึ้นไป นอกจากนี้ยังเป็นยาตัวที่สามที่ได้รับการอนุมัติจาก FDA สำหรับการรักษาการโจมตีของ HAE Icatibant acetate มีโครงสร้างคล้ายกับ d-decapeptide ที่มีลักษณะคล้าย bradykinin แต่มีกรดอะมิโนที่ไม่ได้มาจากโปรตีน 5 ตัว มันทำหน้าที่เป็นศัตรูที่มีศักยภาพและคัดเลือกได้ของตัวรับ bradykinin ประเภท 2 (B2) บรรเทาอาการบวม อักเสบ และความเจ็บปวดในท้องถิ่นที่เกี่ยวข้องกับตอนของ HAE โดยการยับยั้งผลกระทบของ bradykinin HAE เป็นตัวแทนเพียงหนึ่งในหลายข้อบ่งชี้ที่เป็นไปได้ซึ่งอาจระบุสารไอคาติบันต์ได้ การใช้งานที่เป็นไปได้อื่นๆ ได้แก่ โรคหอบหืด โรคตับแข็ง และแองจิโออีดีมาประเภทอื่นๆ ด้วยเหตุนี้ icatibant acetate จึงมีคุณค่าในการรักษาอย่างมีนัยสำคัญและมีโอกาสทางการตลาดในวงกว้าง

สูตรโครงสร้างทางเคมีของอะซิเตตที่ละลายน้ำได้

EสำคัญIข้อมูล

ชื่อภาษาจีน:醋酸艾替班特

ชื่อภาษาอังกฤษ: อะซิเตตที่ละลายน้ำได้

รหัสบริษัท：GT-F005

CAS：138614-30-9；130308-48-4

Sหมายเลขซีเรียล：HD-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH   

Mสูตรโมเลกุล：C59H89N19O13S

Mน้ำหนักโมเลกุล：1304.52

อะซิเตตที่ละลายน้ำได้ สเปกตรัม MS

เส้นทางสังเคราะห์

1: การเตรียมเรซิน Fmoc-Arg (Pbf) -CTC

เติมเรซิน 2-คลอโรไตรเฟนิลเมทิลไอคลอไรด์ 11.1 กรัมที่มีอัตราการทดแทน 0.9 มิลลิโมล/กรัม ลงในคอลัมน์ปฏิกิริยาโซลิดเฟส ตามด้วยการเติมเรซินที่พองตัวด้วย DMF เป็นเวลา 30 นาที เพิ่ม 3.50μL ของ DIPEA ถึง 12.98 กรัมของ Fmoc-Arg(Pbf)-OH และเปิดใช้งานเป็นเวลา 5 นาที; จากนั้นเติมเรซินที่บวมด้วย DMF และปล่อยให้ส่วนผสมเข้าสู่สภาวะสมดุลหลังจากผ่านไป 10 นาที เพิ่มอีก 3.50μL ของ DIPEA ทำปฏิกิริยาที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 45 นาที และสุดท้ายปิดผนึกด้วยเมทานอลเป็นเวลา 20 นาที ระเหยส่วนผสมของปฏิกิริยา ล้างสามครั้งด้วย DMF สามครั้งด้วย DCM จากนั้นหดตัวสามครั้งด้วยเมทานอลเป็นเวลา 3 นาที 5 นาที และ 8 นาที ตามลำดับ ทำให้ได้เรซิน Fmoc-Arg(Pbf)-CTC โดยมีอัตราการทดแทนที่วัดได้ที่ 0.5 มิลลิโมล/กรัม

2：การมีเพศสัมพันธ์ ของ เอฟมอค-โออิค-โอ้

ชั่งน้ำหนักเรซิน Fmoc-Arg (Pbf)-CTC ขนาด 10 มิลลิโมล แล้วเติมลงในเครื่องปฏิกรณ์โซลิดเฟส พองตัวใน DMF เป็นเวลา 0.5 ชั่วโมง จากนั้นนำการป้องกัน Fmoc ออกสองครั้งโดยใช้สารละลาย DBLK 20% เป็นเวลา 10 นาที และ 5 นาที ตามลำดับ หลังจากล้างแล้วให้ผสมกับ Fmoc-Oic-OH ละลาย Fmoc-Oic-OH 11.73 กรัม, HOBt 4.9 กรัม และ DIC 6.1 มล. ใน DCM (อาจเติม DMF จำนวนเล็กน้อยสำหรับการละลาย) กระตุ้นส่วนผสมในอ่างน้ำน้ำแข็งเป็นเวลา 7 นาที จากนั้นถ่ายโอนไปยังเครื่องปฏิกรณ์โซลิดเฟสและทำปฏิกิริยาที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 1–2 ชม. จุดสิ้นสุดของปฏิกิริยาถูกกำหนดโดยวิธี indantrone เมื่อเสร็จแล้ว ให้ดูดส่วนผสมของปฏิกิริยา ล้างด้วย DMF นำสารป้องกัน Fmoc ออกสองครั้งโดยใช้สารละลาย DBLK 20% เป็นเวลา 10 นาทีและ 5 นาที ตามลำดับ ล้างอีกครั้ง และเตรียมสำหรับการจับคู่กับกรดอะมิโนตัวถัดไป

3：การมีเพศสัมพันธ์ ของ เอฟมอค-D-อ้างอิง-โอ้

ละลาย Fmoc-D-Cit-OH 11.91 กรัม, HOAt 5.00 กรัม และ HATU 11.4 กรัม ใน DCM (โดยเติม DMF จำนวนเล็กน้อยเพื่อการละลาย) เติม DIPEA 3.87 กรัม ใต้อ่างน้ำแข็ง และเปิดใช้งานเป็นเวลา 7 นาที จากนั้นจึงถ่ายโอนของผสมไปยังเครื่องปฏิกรณ์โซลิดเฟสและทำปฏิกิริยาที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 1–2 ชั่วโมง. ความสมบูรณ์ของปฏิกิริยาถูกกำหนดโดยวิธีอินไดออล หลังจากทำปฏิกิริยา ให้นำส่วนผสมของปฏิกิริยาออก ล้างด้วย DMF และกำจัดการป้องกัน Fmoc โดยใช้สารละลาย DBLK 20% หลังจากการล้างให้เตรียมคัปปลิ้งกับกรดอะมิโนตัวต่อไป

4：การมีเพศสัมพันธ์ ของ เอฟมอค-เซอร์(tBu)-โอ้

ละลาย Fmoc-Ser(tBu)-OH 11.49 กรัม, HOAt 5.00 กรัม และ DIC 6.1 มล. ใน DCM (โดยเติม DMF จำนวนเล็กน้อยเพื่อการละลาย) หลังจากเปิดใช้งานภายใต้อ่างน้ำแข็งเป็นเวลา 7 นาที ให้ถ่ายโอนของผสมไปยังเครื่องปฏิกรณ์แบบโซลิดเฟสและทำปฏิกิริยาที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 1–2 ชั่วโมง; ความสมบูรณ์ของปฏิกิริยาถูกกำหนดโดยวิธีอินไดออล เมื่อเสร็จสิ้น ให้นำส่วนผสมของปฏิกิริยาออก ล้างด้วย DMF จากนั้นกำจัดการป้องกัน Fmoc โดยใช้สารละลาย DBLK 20% ตามด้วยการล้างก่อนดำเนินการคัปลิงกับกรดอะมิโนถัดไป

5：การมีเพศสัมพันธ์ ของ เอฟมอค-ที-โอ้

ละลาย Fmoc-Thi-OH 11.79 กรัม, HOBt 5.00 กรัม และ HBTU 11.37 กรัม ใน DCM (โดยเติม DMF จำนวนเล็กน้อยเพื่อการละลาย) เติม DIPEA 3.87 กรัม ใต้อ่างน้ำแข็ง และเปิดใช้งานเป็นเวลา 7 นาที จากนั้นจึงถ่ายโอนของผสมไปยังเครื่องปฏิกรณ์โซลิดเฟสและปล่อยให้เกิดปฏิกิริยาที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 1–2 ชั่วโมง. ความสมบูรณ์ของปฏิกิริยาถูกกำหนดโดยวิธีอินไดออล หลังจากทำปฏิกิริยา ให้นำส่วนผสมของปฏิกิริยาออก ล้างด้วย DMF และกำจัดการป้องกัน Fmoc โดยใช้สารละลาย DBLK 20% หลังจากการล้างให้เตรียมคัปปลิ้งกับกรดอะมิโนตัวต่อไป

6：การมีเพศสัมพันธ์ ของ เอฟมอค-กลี-โอ้

ละลาย Fmoc-Gly-OH 8.91 กรัม, HOBt 5.00 กรัม และ TBTU 9.63 กรัมใน DCM (โดยเติม DMF จำนวนเล็กน้อยเพื่อการละลาย) เติม TMP 3.63 กรัมใต้อ่างน้ำแข็งแล้วเปิดใช้งานเป็นเวลา 7 นาที จากนั้นจึงถ่ายโอนของผสมไปยังเครื่องปฏิกรณ์โซลิดเฟสและปล่อยให้เกิดปฏิกิริยาที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 1–2 ชั่วโมง. ความสมบูรณ์ของปฏิกิริยาถูกกำหนดโดยวิธีอินดาโนน หลังจากทำปฏิกิริยา ให้นำส่วนผสมของปฏิกิริยาออก ล้างด้วย DMF และกำจัดการป้องกัน Fmoc โดยใช้สารละลาย DBLK 20% หลังจากการล้างให้เตรียมคัปปลิ้งกับกรดอะมิโนตัวต่อไป

7：การมีเพศสัมพันธ์ ของ  เอฟมอค-ไฮป์(tBu)-โอ้

ละลาย Fmoc-Hyp(tBu) 12.27 กรัม–โอ้, HOAt 5.00 กรัม และ TATU 9.66 กรัมใน DCM (โดยเติม DMF จำนวนเล็กน้อยเพื่อการละลาย) เติม TMP 3.63 กรัมใต้อ่างน้ำแข็งแล้วเปิดใช้งานเป็นเวลา 7 นาที จากนั้นจึงถ่ายโอนของผสมไปยังเครื่องปฏิกรณ์โซลิดเฟสและทำปฏิกิริยาที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 1–2 ชั่วโมง. จุดสิ้นสุดของปฏิกิริยาถูกกำหนดโดยวิธีอินไดออล หลังจากเสร็จสิ้น ให้นำส่วนผสมของปฏิกิริยาออก ล้างด้วย DMF และกำจัดการป้องกัน Fmoc โดยใช้สารละลาย DBLK 20% หลังจากการล้างให้เตรียมคัปปลิ้งกับกรดอะมิโนตัวต่อไป

8：การมีเพศสัมพันธ์ ของ เอฟมอค-โปร-โอ้

ละลาย Fmoc-Pro-OH 10.11 กรัม, HOAt 5.00 กรัม และ HATU 11.4 กรัม ใน DCM (โดยเติม DMF จำนวนเล็กน้อยเพื่อการละลาย) เติม DIPEA 3.87 กรัม ใต้อ่างน้ำแข็ง และเปิดใช้งานเป็นเวลา 7 นาที จากนั้นจึงถ่ายโอนของผสมไปยังเครื่องปฏิกรณ์โซลิดเฟสและทำปฏิกิริยาที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 1–2 ชั่วโมง. จุดสิ้นสุดของปฏิกิริยาถูกกำหนดโดยวิธีอินไดออล เมื่อเสร็จสิ้น ให้นำส่วนผสมของปฏิกิริยาออก ล้างด้วย DMF และกำจัดการป้องกัน Fmoc โดยใช้ DBLK 20% หลังจากล้างแล้วให้เตรียมคัปปลิ้งกับกรดอะมิโนตัวถัดไป

9：การมีเพศสัมพันธ์ ของ เอฟมอค-หาเรื่อง(Pbf)-โอ้

ละลาย Fmoc-Arg(Pbf)-OH 19.44 กรัม HOAt 5.00 กรัม และ HATU 11.4 กรัมใน DCM (โดยเติม DMF จำนวนเล็กน้อยเพื่อการละลาย) เติม DIPEA 3.87 กรัม ใต้อ่างน้ำแข็ง และเปิดใช้งานเป็นเวลา 7 นาที จากนั้นจึงถ่ายโอนของผสมไปยังเครื่องปฏิกรณ์โซลิดเฟสและทำปฏิกิริยาที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 1–2 ชั่วโมง. ความสมบูรณ์ของปฏิกิริยาถูกกำหนดโดยวิธีอินไดออล หลังจากทำปฏิกิริยา ให้นำส่วนผสมของปฏิกิริยาออก ล้างด้วย DMF และกำจัดการป้องกัน Fmoc โดยใช้สารละลาย DBLK 20% หลังจากการล้างให้เตรียมคัปปลิ้งกับกรดอะมิโนตัวต่อไป

10：การมีเพศสัมพันธ์ ของ เอฟมอค-D-หาเรื่อง(Pbf)-โอ้

ละลาย Fmoc-D-Arg(Pbf)-OH 19.44 กรัม, HOAt 5.00 กรัม และ HATU 11.4 กรัมใน DCM (โดยเติม DMF จำนวนเล็กน้อยเพื่อการละลาย) เติม DIPEA 3.87 กรัม ใต้อ่างน้ำแข็ง และเปิดใช้งานเป็นเวลา 7 นาที จากนั้นจึงถ่ายโอนของผสมไปยังเครื่องปฏิกรณ์โซลิดเฟสและทำปฏิกิริยาที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 1–2 ชั่วโมง. จุดสิ้นสุดของปฏิกิริยาถูกกำหนดโดยวิธีอินดิโอโลน หลังจากเสร็จสิ้น ให้นำส่วนผสมของปฏิกิริยาออก ล้างด้วย DMF จากนั้นใช้ DBLK 20% เพื่อขจัดสารป้องกัน Fmoc ล้างสามครั้งด้วย DMF, สามครั้งด้วย DCM และสามครั้งด้วยเมทานอลสำหรับการหดตัว (เป็นเวลา 3 นาที, 5 นาที และ 8 นาที ตามลำดับ) ตามด้วยการอบแห้งแบบสุญญากาศเพื่อให้ได้เรซินเพปไทด์อะซิเตตเอทิแบนท์

HPLC โครมาโตกราฟีของ อะซิเตตที่ละลายน้ำได้

11：เรซินไพโรไลซิสของ อะซิเตตที่ละลายน้ำได้

เตรียมรีเอเจนต์สลาย 200 มล. ที่ประกอบด้วยกรดไตรฟลูออโรอะซิติก 190 มล., ไตรไอโซโพรพิลไซเลน 6 มล. และน้ำ 4 มล. แล้วทำให้เย็นลงในตู้เย็นล่วงหน้าเป็นเวลา 30 นาที เติมเอติบันต์เปปไทด์อะซิเตตเรซิน 20.0 กรัมลงในขวดก้นกลมขนาด 500 มล. จากนั้นเติมรีเอเจนต์สลายตัว 200 มล. ที่เตรียมไว้ลงในเรซินขณะกวนภายใต้อ่างน้ำแข็งและภายใต้การไหลของไนโตรเจน หลังจากเกิดปฏิกิริยาเป็นเวลา 30 นาที ให้นำอ่างน้ำแข็งออกและทำปฏิกิริยาต่อที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 2 ชั่วโมง กรองเรซินและรวบรวมสารกรอง ล้างเรซินด้วยกรดไตรฟลูออโรอะซิติกจำนวนเล็กน้อย กรอง และผสมสารกรองเข้าด้วยกัน ค่อยๆ เติมสารกรองลงในอีเทอร์เย็นน้ำแข็ง 20 ลิตร เกิดการตกตะกอนสีขาว ปั่นแยกที่ 3000 รอบต่อนาทีเพื่อรวบรวมตะกอน ล้างห้าครั้งด้วยอีเทอร์เย็นน้ำแข็ง และแห้งภายใต้ความดันลดลงเพื่อให้ได้เปปไทด์ดิบ 10.3 กรัมที่มีความบริสุทธิ์ของ HPLC>90%